樣品總膳食纖維的測定

膳食纖維是一組食物成分，它們在人體消化過程中不被吸收或消化，在腸道中發(fā)揮著重要的生理作用。這些成分主要存在于植物性食物中，如谷物、水果、蔬菜、豆類、堅果和種子。

2024-05-07 09:08:06廣州淘儀科技有限公司

膳食纖維是一組食物成分，它們在人體消化過程中不被吸收或消化，在腸道中發(fā)揮著重要的生理作用。這些成分主要存在于植物性食物中，如谷物、水果、蔬菜、豆類、堅果和種子。膳食纖維主要分為以下兩大類。**，水溶性膳食纖維。這一類膳食纖維在水中能夠溶解，形成黏性物質(zhì)。水溶性膳食纖維包括各種多糖和寡糖，如果膠、黏多糖、明膠和半乳糖等。這些成分在腸道內(nèi)形成膠狀物質(zhì)，有助于調(diào)節(jié)血糖水平，降低血脂、*******，并促進益生菌的生長，維護腸道健康。第二、不溶性膳食纖維。著一類膳食纖維在水中不溶解，具有強大的吸收能力。不溶性膳食纖維包括纖維素、半纖維素和木質(zhì)素等，它們可增加糞便容積，促進腸道蠕動，預(yù)防**，有助于維護結(jié)腸健康，同時減少有害物質(zhì)的吸收。膳食纖維對消化系統(tǒng)的健康具有**影響。不溶性膳食纖維增加了糞便體積，促進了腸道蠕動，從而預(yù)防**，并減少了與**相關(guān)的疾病風(fēng)險，如痔瘡和結(jié)腸*。其次，膳食纖維在體重管理中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。它們具有出色的吸水性，能夠在胃內(nèi)膨脹，使人們產(chǎn)生飽腹感，降低進食量，有助于控制體重，減少肥胖相關(guān)疾病的風(fēng)險，例如2型糖尿病和***。

膳食纖維目前的測定方法主要是酶解法和高效液相色譜法。酶解法的基本原理是通過模擬人體胃腸道中的酶解過程來測量膳食纖維的含量。首先，樣品通常會通過加工除去非膳食纖維的組分，如脂肪和蛋白質(zhì)。其次，樣品會與胃酸和胃蛋白酶混合，模擬胃部的酶解。再次，樣品會被加入腸蛋白酶，模擬小腸中的酶解。在酶解過程中，膳食纖維不被分解，而其他可消化食物成分會被水解。*后，通過測量未被分解的膳食纖維殘留量，可以計算出樣品中的總膳食纖維含量。

例如采用意大利VELP膳食纖維分析儀進行玉米片總膳食纖維含量的測定：干燥的無脂肪樣品用熱穩(wěn)定的a淀粉酶凝膠化，用淀粉葡萄糖苷酶消化去除淀粉，蛋白酶去除蛋白質(zhì)?？扇苄陨攀忱w維用乙醇沉淀。然后將殘渣過濾，用乙醇和**洗滌，干燥并稱重。其中一個重復(fù)的樣本被檢測為不消化的蛋白質(zhì)，另一個被灰化?？偵攀忱w維是酶消化殘渣的重量法減去未消化的蛋白質(zhì)和灰分的重量。操作過程如下：酶的消化和過濾程序

通過整個過程運行兩個空白區(qū)域，以控制試劑對*終結(jié)果的可能貢獻。

1.將1g樣品，稱0.1毫克，與50毫升pH6.0的磷酸鹽緩沖液混合在400毫升燒杯中。加入一個磁性攪拌棒。

2.加入100μl熱穩(wěn)定的a淀粉酶溶液。徹底混合，用鋁箔覆蓋燒杯，并放置在GDE在95-100°C持續(xù)30min。在連續(xù)攪拌下，樣品溫度達到95-100°C，酶解15分鐘。

3.將燒杯從沸水浴中取出，然后冷卻至室溫。

4.取下鋁箔，用10毫升蒸餾水沖洗燒瓶內(nèi)壁。用0毫升氫氧化鈉溶液調(diào)整pH至7.5±0.2。

5.將GDE溫度設(shè)置為60°C，加入蒸餾水至95—100°C。

6.加入100μl的蛋白酶溶液。將覆蓋有鋁箔的燒杯在60°C下連續(xù)攪拌，持續(xù)30分鐘。

7.冷卻至室溫。用10ml0.325N鹽酸溶液將pH調(diào)整至4.5±0.2。通過pH計控制pH。

8.加入200μl淀粉類葡萄糖苷酶溶液。將覆蓋有鋁箔的燒杯在60°C下連續(xù)攪拌，持續(xù)30分鐘。當(dāng)溫度達到60°C時，開始計時。

9.拆下磁力攪拌棒。加入280ml95%乙醇，預(yù)熱至60°C（加熱前測量體積）。在室溫下，讓沉淀形成60分鐘。

10.玻璃坩堝應(yīng)徹底清洗，加入約1克硅藻石，在550°C下放置5小時，在室溫干燥器中冷卻至恒定重量，稱重至*接近0.1毫克（坩堝皮重）。

11.用78%的乙醇浸泡含有硅石的坩堝，得到均勻的無孔硅石床。

12.在CSF6過濾設(shè)備中設(shè)置坩堝，應(yīng)用真空。定量酶解通過漏斗轉(zhuǎn)移到坩堝。啟動過濾程序。13.過濾后，用3體積20ml78%乙醇、2體積10ml95%乙醇和2體積10ml**沖洗坩堝中的殘渣。如果殘留物上的粘膠膜損害過濾，保留液體，用輕微的空氣流動操作過濾單元上的空氣閥打破表面。

14.在105°C（70°C在真空烤箱中）的空氣烤箱中干燥殘渣和硅酸鹽過夜。在干燥器中冷卻，稱重至*接近0.1毫克。殘渣的重量由*終重量減去坩堝皮重的重量得到。

15.其中一個重復(fù)殘基用凱氏定氮法測定未消化蛋白質(zhì)含量(N*6.25)。第二個重復(fù)的殘留物將被焚燒以測定灰分含量。

16.凱氏定氮蛋白測定:將3個坩堝的所有含量轉(zhuǎn)移到3個凱氏定氮試管中，并按中進行應(yīng)用說明“飼料產(chǎn)品中N/蛋白質(zhì)的測定”

17.灰分測定:第二個重復(fù)殘留物在550°C的馬弗爐中焚燒5小時。為了避免熱沖擊，建議逐步加熱。讓坩堝在干燥器中冷卻，稱重至*接近0.1毫克。18.校正未消化蛋白質(zhì)和灰分含量分別測定的結(jié)果為了使GDE達到95-100°C的溫度，建議使用浮球（代碼A00000241）。