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自古人參就有百草**的美譽。2002年,衛(wèi)生部《關于進一步規(guī)范保健品原料管理的通知》[衛(wèi)法監(jiān)發(fā)(2002)51號]把人參(包括人參、人參葉、人參果)列入可用保健品食品原料的名單后,人參根、莖、葉正式作為保健品原料使用。目前,市場上人參類的保健品已有上百種,包括人參酒、人參茶、人參口服液、人參膠囊、人參含片等。2012年,衛(wèi)生部批準人參可以作為新資源食品使用后,人參根、莖、葉在食品、保健品的應用將有更廣闊的前景。
人參根中含有大量具有生物活性的多肽和人參蛋白。二維電泳技術已證明,人參中含有人參蛋白質300余種,其中部分水溶性蛋白質已被證明具有抗輻射、抗病毒、抗**、抗休克等方面的作用。人參是多年生植物,每年可以收獲大量的人參莖、葉,人參莖、葉制品具有一定的市場前景。杜馬斯燃燒法與凱氏定氮法相比,更加簡單快速,可用于人參蛋白質含量測定,采用杜馬斯燃燒法測定了人參根、莖、葉的蛋白質含量,可以作為開發(fā)人參莖、葉產(chǎn)品的理論基礎。
01材料與試劑
在撫松縣榆樹鄉(xiāng)參場,隨機選取6個樣品采摘點,每個點隨機抽取5組6年生人參的根、莖、葉作為試驗材料。共計30組人參根、莖、葉樣品。
EDTA(意大利VELP公司)。CN802杜馬斯定氮儀(意大利VELP公司)
02測試方法
當燃燒反應器溫度達1030℃以上、還原反應器溫度達650℃以上、氦氣(純度≥99.99%)壓力達200kPa以上、氧氣(純度≥99.99%)壓力達250kPa以上及氮氣(純度≥99.99%)壓力達300kPa以上時,自動進樣檢測。
分別稱取EDTA標品0、12.2、21.7、30.1、41.2、52.8、62.4、75.4、82.4、93.3、100.3、113.6、122.6mg,用錫箔紙包好,經(jīng)制樣器制樣后檢測,繪制標準曲線。以總氮質量(mg)為橫坐標、峰面積(mv×s)為縱坐標繪制標準曲線。曲線方程:
鮮參樣品經(jīng)洗刷瀝水后置于50℃烘箱內(nèi)干燥,粉碎后過80目篩,密封留存待用。以EDTA作為檢測時的標準物質。在測定前,所有樣品以及EDTA標準物質均在70℃烘箱內(nèi)再次干燥72h,置于干燥器內(nèi),待測。準確稱取干粉樣品,用錫箔紙包好,壓縮空氣。
以標準品EDTA作為樣品,在上述測定條件下連續(xù)測定11次,RSD值為0.317%(n=11),結果表明,儀器精密度良好。
隨機選取一個樣品的根、莖、葉,分別重復測定6次,統(tǒng)計分析結果,數(shù)據(jù)均符合X∈X±2s,根蛋白質含量的平均值為15.851%,RSD為0.322%;莖蛋白質含量的平均值為8.561%,RSD為0.341%;葉蛋白質含量的平均值為12.704%,RSD為0.326%。說明該試驗方法的重現(xiàn)性良好。
取已知含量的人參根、莖、葉粉末作為樣品,各稱取2個樣,分別加入EDTA0.8、2.4、4.6、7.2、9.0、10.4mg。制樣后按照“2.1”項下條件測定,統(tǒng)計結果,平均回收率達99.83%。
30組樣品制備完成后,置于自動進樣盤上。按照“2.1”項下條件進行蛋白質含量測定,每個樣品平行測定3次。采用杜馬斯定氮儀可自動計算出含氮量,運用公式蛋白質含量=含氮量×6.25計算出蛋白質含量,蛋白質含量為3次平行測定的平均值。利用Excel及SAS9.2統(tǒng)計系統(tǒng)中的單因素方差分析程序對蛋白質含量進行方差分析和單因素比較。
6個樣品組間根、莖中蛋白質含量無**差異;葉中樣品1、4、5、6間無**差異,但**高于樣品2,樣品1、3、4、5間無**差異,樣品2、3間無**差異。
6個樣品點間人參蛋白質含量比較(%)
注:同列不同小寫字母表示不同樣品點間差異**(P<0.05)。
將每個樣點間的人參根、莖、葉蛋白質含量進行比較發(fā)現(xiàn),除樣點5外,其余樣點根、莖、葉蛋白質含量均存在**差異,表現(xiàn)為根>葉>莖;樣點5根、葉中蛋白質含量**高于莖,根與葉的蛋白質含量無**差異;根部蛋白質含量為14%~15%,莖部蛋白質含量為6%~8%,葉部蛋白質含量為10%~14%,根部蛋白質含量**高于葉部蛋白質含量,葉部蛋白質含量**高于莖部蛋白質含量;根部與莖部蛋白質含量在不同樣點間較穩(wěn)定,葉部蛋白質含量在不同樣點間變化較大。
人參根、莖、葉中蛋白質含量比較
不同小寫字母表示不同部位間差異**(P<0.05)
03結論
試驗結果表明,6個采樣點間人參根和莖的蛋白含量無**差異,而6個采樣點間葉部蛋白質含量差異**,可能是由于葉片為采樣時期的主要生長組織,各植株生長狀態(tài)有所不同,也可能是光照等環(huán)境因素造成的;而任一組內(nèi)蛋白質含量個體之間無**差異;但同一人參樣品的根、莖、葉間存在**差異。
人參根蛋白質含量**(14%~15%),其次是人參葉(10%~14%),**的是人參莖(6%~8%),但就蛋白質總含量而言,人參根、莖、葉部分含有很高的蛋白質營養(yǎng)成分,**開發(fā)其深加工產(chǎn)品具有一定意義。
本試驗采用杜馬斯燃燒法,測定了樣品中的全氮含量,而有關人參根、莖、葉中蛋白氮和非蛋白氮的檢測以及人參根、莖、葉中蛋白質種類和藥理作用還有待進一步研究。