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基于印度科學(xué)家C.V.拉曼(Raman)發(fā)現(xiàn)拉曼散射效應(yīng):不同的入射光頻率的散射光譜進(jìn)行分析所得到的分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)的信息,并應(yīng)用于分子結(jié)構(gòu)分析研究的一種分析方法,稱為拉曼光譜(Ramanspectra)。
一、拉曼散射光譜具有以下明顯的特征:
a.拉曼散射譜線的波數(shù)雖然隨入射光的波數(shù)而不同,但對(duì)同一樣品,同一拉曼譜線的位移與入射光的波長(zhǎng)無(wú)關(guān),只和樣品的振動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)有關(guān)。
b.在以波數(shù)為變量的拉曼光譜圖上,斯托克斯線和反斯托克斯線對(duì)稱地分布在瑞利散射線兩側(cè),這是由于在上述兩種情況下分別相應(yīng)于得到或失去了一個(gè)振動(dòng)量子的能量。
c.一般情況下,斯托克斯線比反斯托克斯線的強(qiáng)度大。這是由于Boltzmann分布,處于振動(dòng)基態(tài)上的粒子數(shù)遠(yuǎn)大于處于振動(dòng)激發(fā)態(tài)上的粒子數(shù)。
二、拉曼光譜技術(shù)的優(yōu)越性
提供快速、簡(jiǎn)單、可重復(fù)、且更重要的是無(wú)損傷的定性定量分析,它無(wú)需樣品準(zhǔn)備,樣品可直接通過(guò)光纖探頭或者通過(guò)玻璃、石英、和光纖測(cè)量。
①由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光譜是研究水溶液中的生物樣品和化學(xué)化合物的理想工具。
②拉曼一次可以同時(shí)覆蓋50~4000波數(shù)的區(qū)間,可對(duì)有機(jī)物及無(wú)機(jī)物進(jìn)行分析。相反,若讓紅外光譜覆蓋相同的區(qū)間則必須改變光柵、光束分離器、濾波器和檢測(cè)器。
③拉曼光譜譜峰清晰尖銳,更適合定量研究、數(shù)據(jù)庫(kù)搜索、以及運(yùn)用差異分析進(jìn)行定性研究。在化學(xué)結(jié)構(gòu)分析中,單獨(dú)的拉曼區(qū)間的強(qiáng)度可以和功能集團(tuán)的數(shù)量相關(guān)。
④因?yàn)榧す馐闹睆皆谒木劢共课煌ǔV挥?.2~2毫米,常規(guī)拉曼光譜只需要少量的樣品就可以得到。這是拉曼光譜相對(duì)常規(guī)紅外光譜一個(gè)很大的優(yōu)勢(shì),而且拉曼顯微鏡物鏡可將激光束進(jìn)一步聚焦至20微米甚至更小,可分析更小面積的樣品。
⑤共振拉曼效應(yīng)可以用來(lái)有選擇性地增強(qiáng)大生物分子發(fā)色基團(tuán)的振動(dòng),這些發(fā)色基團(tuán)的拉曼光強(qiáng)能被選擇性地增強(qiáng)1000到10000倍。
拉曼光譜可以用來(lái)分析很多不同類型的樣品,通常包括以下種類:
固體、粉末、液體、膠體、軟膏、氣體;
無(wú)機(jī)材料、有機(jī)材料、生物材料;
純物質(zhì)、混合物、溶液;
一般來(lái)說(shuō),拉曼不適合分析以下樣品:金屬及其合金。
目前拉曼光譜應(yīng)用的典型例子包括:
藝術(shù)品和考古——顏料、陶瓷以及寶石的表征與鑒定;
碳材料——碳納米管的結(jié)構(gòu)與純度、缺陷/無(wú)序度表征;
化學(xué)——結(jié)構(gòu)、純度、反應(yīng)監(jiān)控;
地質(zhì)學(xué)——礦物鑒別和分布、包裹體、相變;
生命科學(xué)——單個(gè)細(xì)胞或組織表征,藥物、疾病診斷;
藥學(xué)——藥物成分均勻性和組分分布;
半導(dǎo)體——純度、摻入成分、應(yīng)力。
布魯克拉曼光譜儀的性能特點(diǎn)
1、科研級(jí)光譜性能
該光譜儀擁有高檢測(cè)靈敏度和高光譜分辨率,同時(shí)確保了良好的空間分辨率。在mapping和成像測(cè)定中,可通過(guò)一次掃描,以4cm-1分辨率記錄全部拉曼光譜。對(duì)于諸如同位素分裂或多晶現(xiàn)象等要求嚴(yán)苛的研究,只需輕點(diǎn)鼠標(biāo),即可將分辨率設(shè)置為1.5cm-1。
2、較好的波數(shù)準(zhǔn)確度
要得到可重復(fù)的分析結(jié)果,準(zhǔn)確校正波長(zhǎng)必不可缺。布魯克獨(dú)特的SureCALTM技術(shù)確保了全自動(dòng)連續(xù)校正波長(zhǎng),而無(wú)需用戶進(jìn)行任何操作。
3、操作直觀而又輕松
不論是對(duì)于常規(guī)用戶,還是對(duì)于專家,該光譜儀都是一個(gè)使用起來(lái)非常簡(jiǎn)便而又直觀的系統(tǒng)。硬件和軟件合為一體。當(dāng)操作人員在軟件引導(dǎo)下執(zhí)行顯微拉曼光譜分析工作流程時(shí),所有相關(guān)硬件改變均自動(dòng)完成。
4、簡(jiǎn)便地執(zhí)行拉曼光譜成像
該光譜儀具備強(qiáng)大的共焦拉曼光譜成像和mapping功能,可以直接使用,無(wú)需費(fèi)時(shí)選擇參數(shù)。高效數(shù)據(jù)采集與高精度mapping樣品臺(tái)相結(jié)合,可實(shí)現(xiàn)亞微米級(jí)空間分辨率,快速生成拉曼光譜成像。即使是高分辨率拉曼光譜成像,亦可在數(shù)秒鐘內(nèi)采集完畢。
5、高效而又靈活
該光譜儀能讓你快速而又順利地獲得期望的結(jié)果。從觀察樣品,到檢查光譜質(zhì)量,再到設(shè)定感興趣區(qū)域,它可分步驟引導(dǎo)用戶執(zhí)行數(shù)據(jù)采集程序,然后,才開始執(zhí)行拉曼光譜測(cè)定。執(zhí)行每個(gè)分析步驟時(shí),屏幕只顯示可使用的功能。但同時(shí),該光譜儀維持了較廣靈活性,可滿足具挑戰(zhàn)的研究應(yīng)用的要求。
6、輕而易舉地從光譜得出結(jié)果
在執(zhí)行測(cè)定的同時(shí),該光譜儀可按照用戶預(yù)先設(shè)定的分析方法評(píng)估數(shù)據(jù)。OPUS軟件包含各式各樣的單變量法和多變量法的化學(xué)計(jì)量方法,可以將采集到的拉曼光譜轉(zhuǎn)換成有意義的圖像。歸功于智能搜索算法和不計(jì)其數(shù)的拉曼光譜庫(kù),鑒定試樣成分易如反掌。
7、一切盡在掌控
只需加載預(yù)先設(shè)定的測(cè)量設(shè)置參數(shù),即可將該光譜儀配置為執(zhí)行特定應(yīng)用或?qū)嶒?yàn)。按照該等參數(shù)文件的設(shè)定,系統(tǒng)將自動(dòng)選定所有儀器部件,如激光器、光柵和光圈等。此外,軟件中的任何儀器參數(shù)交互適配,都將使系統(tǒng)立即調(diào)整硬件配置。高度儀器智能可避免選擇錯(cuò)誤配置。
SENTERRA II是一款易操作、免維護(hù)的共聚焦拉曼顯微鏡。使用高度自動(dòng)化的SENTERRA II,可以便捷地在失效分析、質(zhì)量控制和科學(xué)研究中進(jìn)行拉曼光譜分析和成像。